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菌種凍干機(jī)保存菌種的步驟主要包括哪些

更新時(shí)間:2022-05-12瀏覽:686次

 
  菌種凍干機(jī)是一款專門針對(duì)菌種保存而設(shè)計(jì)的凍干機(jī)。利用安剖管架預(yù)凍好的樣品直接轉(zhuǎn)移擺放到凍干倉隔板上即可,容量大,操作簡(jiǎn)便。316L醫(yī)用級(jí)不銹鋼材質(zhì)方形凍干倉,隔熱保溫效果好,真空性能好,有效避免樣品因干燥過程中升溫過快而發(fā)生樣品外形塌陷,活性降低等問題。是研究菌種保存客戶的理想選擇。
 

 

  冷凍干燥是將菌體懸浮液冷凍到冰點(diǎn)以下,從而轉(zhuǎn)變?yōu)楣腆w結(jié)晶態(tài),然后在低溫低壓(真空)下使固體升華而脫水的干燥方法。一般干燥處理過程會(huì)破壞微生物的細(xì)胞膜,引起細(xì)胞的大量死亡,因此需要添加保護(hù)劑,能夠使菌液密度均一,減少活菌在凍干過程中的機(jī)械效應(yīng)和溶質(zhì)效應(yīng)帶來的死亡。因此,在凍干前加入的保護(hù)劑配方就成為了至關(guān)重要的決定性因素,它既會(huì)影響到儲(chǔ)存期細(xì)胞的活性以及穩(wěn)定性,也會(huì)影響到復(fù)水時(shí)細(xì)胞存活率。
 
  菌種凍干機(jī)保存菌種的步驟主要包括:
 
  1、微生物培養(yǎng),培養(yǎng)獲得健壯的菌種擴(kuò)培液體。培養(yǎng)時(shí)根據(jù)菌種選擇不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)到對(duì)數(shù)期獲得大量健壯的菌種,保證菌體濃度,一般達(dá)到109的濃度.
 
  2、離心收集菌體。通過離心法從液體培養(yǎng)基中獲得菌體。如果是固體培養(yǎng)基可以直接收集菌落,用保護(hù)劑溶解混勻。
 
  3、將菌體、脫脂奶粉、海藻糖、蔗糖等保護(hù)劑在無菌水中混勻得到含有保護(hù)劑的菌體混懸液。
 
  4、分裝。將菌體混懸液在無菌環(huán)境中分裝到無菌容器中,可以是安瓿瓶、西林瓶、EP、培養(yǎng)皿等。
 
  5、預(yù)凍,預(yù)凍是非常關(guān)鍵的。預(yù)凍不好,菌體會(huì)死亡。要快速預(yù)凍,防止產(chǎn)生大冰晶造成細(xì)胞死亡。預(yù)凍要凍結(jié)實(shí),保證預(yù)凍充分。
 
  6、將預(yù)凍好的菌體,放入真空冷凍干燥設(shè)備中進(jìn)行凍干。如果是設(shè)備帶預(yù)凍功能,也可以直接在凍干機(jī)上進(jìn)行預(yù)凍。真空冷凍干燥時(shí)間和凍干曲線的設(shè)計(jì)要根據(jù)菌種的不同和菌體混懸液的濃度等進(jìn)行設(shè)計(jì)。凍干好后真空密封保存。